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    SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應

    SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應

    簡要描述:貨  號:P0500
    名  稱:SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應
    規  格:50T
    價  格:460.00

    產品型號:

    所屬分類:其他自產即用試劑

    更新時間:2025-02-21

    廠商性質:經銷商

    詳情介紹

    SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應

     

    名稱

    規格

    保存條件

    5×蛋白上樣緩沖液(含DTT

    1ml

    -20

    Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液

    一包(10L

    RT

    30%丙烯酰胺(29:1)

    100mlX2

    2-8

    1.5mol/LTris(pH8.8)

    100mlX2

    RT

    1.0mol/LTris(pH6.8)

    60ml

    RT

    過硫酸銨干粉

    2g

    RT

    10%SDS

    10ml

    RT

    TEMED

    1.5ml

    RT

    說明書

    一份

    一份

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    產品簡介

    本公司提供的蛋白電泳套裝包含凝膠制備,蛋白上樣緩沖液及蛋白電泳上樣緩沖液。

    本公司生產的SDS-PAGE蛋白電泳套裝是按照經典方法配制而成。本套裝根據電泳體系的大小,可進行約50次左右。

    SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應

    使用說明:

    一,前期工作:蛋白提取及定量。

    二,蛋白上樣液的制備:蛋白上樣緩沖液解凍,輕輕混勻,按4體積蛋白樣品加入一體積的5×蛋白上樣緩沖液,混勻,沸水中水浴5分鐘。

    三,電泳液的配制:將一包電泳液干粉全部倒入1L-2L的燒柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋5倍或者先配成1L成為10×Tris-甘氨酸蛋白電泳緩沖液,用前再稀釋10倍。

    四,取10-15支1.5ml離心管,將過硫酸銨干粉分裝成100mg/支,標記好備用。

    五,凝膠制備:

    1,  取一支稱好的100mg過硫酸銨干粉,加入1ml蒸餾水,混勻,此配好的10%過硫酸銨溶液2-8度可保存一周,一周后請用新的。洗干凈電泳玻璃板,夾好。

    2,  根據目標蛋白分子量大小,選取凝膠濃度,按下表配制。先配分離膠,再配濃縮膠。

     

     

    分離膠15%

    分離膠12%

    分離膠10%

    分離膠8%

    濃縮膠(5%)

    總體積

    10ml

    10ml

    10ml

    10ml

    5ml

    30%丙烯酰胺(29:1)

    5ml

    4ml

    3.3ml

    2.7ml

    0.83ml

    1M Tris-HCL (PH6.8)

    0

    0

    0

    0

    0.625ml

    1.5M Tris-HCL(PH8.8)

    2.5ml

    2.5ml

    2.5ml

    2.5ml

    0

    10%SDS

    100ul

    100ul

    100ul

    100ul

    50ul

    ddH2O

    2.3ml

    3.3ml

    4.0ml

    4.6ml

    3.42ml

    10%過硫酸銨

    100ul

    100ul

    100ul

    100ul

    75ul

    TEMED

    10ul

    10ul

    10ul

    10ul

    7.5ul

     

     

     

     

     

     

     

     

    注意:

    1,TEMED和10%過硫酸銨zui后加,在加入前需混勻前面所加試劑。10%過硫酸銨在4℃有效期為一周,TEMED易揮發,使用后請蓋緊瓶蓋。在常溫下膠30分鐘內可以凝固,如溫度過低,可放37℃溫箱凝固。灌完分離膠后,輕輕的加1ml ddH2O封上層,膠凝固后可見到分界線。灌濃縮膠前,先傾去水層,再用吸紙吸干。濃縮膠灌好后立刻插入梳子。濃縮膠凝固后,放入電泳液中(讓電泳液漫過加樣孔),輕輕的撥出梳子,可防加樣孔變形。

    2,配制量可按上表等比加減。如果所用膠濃度與上面不同,可自行調整,主要是調整30%丙烯酰胺的量(需要濃度×總體積/30%),zui后用水補足總體積。

    六,上樣,電泳,一般是濃縮膠80V,分離膠120V恒壓,等溴酚蘭電泳到合適的位置,結束電泳,染色或者進行下一步實驗。

     附:SDS-PAGE分離膠的濃度與*分離范圍

    SDS-PAGE分離膠濃度

    *分離范圍

    6%膠

    57-212kD

    8%膠

    36-94kD

    10%膠

    20-80kD

    12%膠

    12-60kD

    15%膠

    10-43kD


    配制6%的PAGE分離膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積51015

    20

    25

    30

    蒸餾水

    2.6

    5.3

    7.9

    10.6

    13.2

    15.9

    30%丙烯酰胺混合液

    1.0

    2.0

    3.0

    4.0

    5

    6.0

    1.5mol/L Tris(pH8.8)

    1.3

    2.5

    3.8

    5.0

    6.3

    7.5

    10%SDS

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    10%過硫酸銨0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    TEMED

    0.004

    0.008

    0.012

    0.016

    0.02

    0.024


    配制8%的PAGE分離膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積

    5

    10

    15

    20

    25

    30

    蒸餾水

    2.3

    4.6

    6.99.3

    11.5

    13.9

    30%丙烯酰胺混合液

    1.3

    2.7

    4.0

    5.3

    6.7

    8.0

    1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

    2.5

    3.8

    5.0

    6.3

    7.5

    10%SDS

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    10%過硫酸銨

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    TEMED

    0.003

    0.006

    0.009

    0.012

    0.015

    0.018


    配制10%的PAGE分離膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積

    5

    10

    1520

    25

    30

    蒸餾水1.9

    4.0

    5.97.9

    9.9

    11.9

    30%丙烯酰胺混合液

    1.7

    3.3

    5.0

    6.7

    8.3

    10.0

    1.5mol/L Tris(pH8.8)

    1.3

    2.5

    3.8

    5.0

    6.3

    7.5

    10%SDS0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    10%過硫酸銨

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    TEMED

    0.002

    0.004

    0.006

    0.008

    0.01

    0.012


    配制12%的PAGE分離膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積

    5

    10

    15

    2025

    30

    蒸餾水1.63.3

    4.9

    6.6

    8.2

    9.9

    30%丙烯酰胺混合液

    2.0

    4.0

    6.0

    8.0

    10.0

    12.0

    1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

    2.5

    3.8

    5.0

    6.3

    7.5

    10%SDS

    0.05

    0.1

    0.015

    0.2

    0.25

    0.3

    10%過硫酸銨

    0.05

    0.1

    0.015

    0.2

    0.25

    0.3

    TEMED

    0.002

    0.004

    0.006

    0.008

    0.01

    0.012


    配制15%的PAGE分離膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積

    5

    10

    15

    20

    25

    30

    蒸餾水

    1.1

    2.33.44.6

    5.7

    6.9
    30%丙烯酰胺混合液

    2.5

    5.0

    7.5

    10.0

    12.5

    15.0

    1.5mol/L Tris(pH8.8)

    1.3

    2.5

    3.8

    5.0

    6.3

    7.5
    10%SDS

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    10%過硫酸銨

    0.05

    0.1

    0.15

    0.2

    0.25

    0.3

    TEMED

    0.002

    0.004

    0.006

    0.008

    0.001

    0.012


    3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的濃縮膠(也稱上層膠、積層膠或堆積膠)
                        
                                          配制不同體積的濃縮膠

    成分

    所需各成分的體積(毫升)

    凝膠體積

    2

    3

    4

    5

    6

    8

    蒸餾水

    1.4

    2.1

    2.7

    3.4

    4.1

    5.5

    30%丙烯酰胺混合液

    0.33

    0.5

    0.67

    0.83

    1.0

    1.3

    1.0mol/L Tris(pH6.8)

    0.25

    0.38

    0.5

    0.63

    0.75

    1.0

    10%SDS

    0.02

    0.03

    0.04

    0.05

    0.06

    0.08

    10%過硫酸銨

    0.02

    0.03

    0.04

    0.05

    0.06

    0.08

    TEMED

    0.002

    0.003

    0.004

    0.005

    0.006

    0.008

     

    SDS-PAGE蛋白電泳套裝現貨供應



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