發(fā)光底物HRP有哪些使用要點？

　　發(fā)光底物HRP基于增強型化學(xué)發(fā)光底物研制而成，在HRP的催化下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而發(fā)光，可用于檢測人血清或血漿中的病毒表面抗原。其高靈敏度能夠檢測低皮克級別的抗原，發(fā)光信號強烈持久，可以使用微孔板式化學(xué)發(fā)光檢測儀進行測定。

 

　　發(fā)光底物HRP是一種高靈敏度的增強型化學(xué)發(fā)光底物試劑，采用發(fā)光底物系統(tǒng)，并對成份進行了優(yōu)化。產(chǎn)品背景低，穩(wěn)定性好，信號的靈敏度及強度高，發(fā)光時間持久。比普通ECL試劑敏感度高數(shù)十倍。用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶HRP的抗體及其關(guān)聯(lián)的抗原。可以靈敏地檢測出目的蛋白的存在。它由辣根過氧化物酶（HRP）催化發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，發(fā)出熒光，可對X光膠片曝光，也可直接進行檢測或者熒光CCD掃描。

 

　　發(fā)光底物HRP的使用要點：

　　•ECLA液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭，A液和B液相互污染后會導(dǎo)致A液或B液逐漸失效，影響后續(xù)的使用效果。

 

　　•即用即配，用多少配多少，混合配好的ECL工作液可以在4度避光穩(wěn)定保存7天。

 

　　•為避免產(chǎn)生高背景，應(yīng)全程佩戴手套處理轉(zhuǎn)印膜。

 

　　•使用平頭鑷子夾取轉(zhuǎn)印膜，避免膜撕裂或留下夾痕。

 

　　•切勿在任何封閉液或洗滌液中添加抑制劑，會抑制HRP活性。

 

　　•根據(jù)蛋白豐度不同曝光時間可能是數(shù)秒至數(shù)小時。曝光時間過長會使背景加深，曝光不足會導(dǎo)致條帶模糊。

 

　　•如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液或者抗體剝離液Reblot洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。

 

　　•使用高質(zhì)量保鮮膜。